Amidase (AMD)
Enzimas:Son catalizadores biolóxicos macromoleculares, a maioría dos encimas son proteínas
Amidase:Catalizar a hidrólise de varias amidas alifáticas e aromáticas endóxenas e alleas mediante a transferencia dun grupo acilo á auga coa produción de ácidos libres e amoníaco. Os ácidos hidroxámicos e outros ácidos orgánicos úsanse amplamente como fármacos porque son constituíntes de factores de crecemento, antibióticos e inhibidores tumorais. As amidases pódense dividir en acilases de tipo R e de tipo S segundo a estereoselectividade do catalizador.
Ademais de catalizar a hidrólise das amidas, a amidase tamén pode catalizar reaccións de transferencia de acilo en presenza de cosubstratos como a hidroxilamina.
As amidases con diferentes fontes teñen diferente especificidade de substrato, algunhas delas só poden hidrolizar amidas aromáticas, outras só poden hidrolizar amidas alifáticas e outras hidrolizan α- ou ω-aminoamidas. A maioría das aminas só teñen boa actividade catalítica para amidas aromáticas acíclicas ou simples, pero para aromáticos complexos, as amidas heterocíclicas, especialmente as amidas con substituíntes orto, xeralmente teñen baixa actividade (só uns poucos encimas presentan mellores efectos catalíticos).
Mecanismo catalítico:
| Enzimas | Código do produto | Código do produto |
| Enzima en po | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | un conxunto de 19 amidases, 50 mg cada unha 19 artigos * 50 mg / artigo, ou outra cantidade |
| Kit de cribado (SynKit) | ES-AMD-1900 | un conxunto de 19 amidases, 1 mg cada unha 19 elementos * 1 mg / elemento |
★ Alta especificidade do substrato.
★ Forte selectividade quiral.
★ Alta eficiencia de conversión.
★ Menos subprodutos.
★ Condicións de reacción suaves.
★ Respectuoso co medio ambiente.
➢ A selección de encimas debe levarse a cabo para substratos específicos debido á especificidade do substrato e obter un encima que catalice o substrato diana co mellor efecto catalítico.
➢ Nunca o poña en contacto con condicións extremas como: altas temperaturas, pH alto/baixo e solventes orgánicos con alta concentración.
➢ Normalmente, o sistema de reacción debería incluír substrato e solución tampón (o pH óptimo de reacción do encima). Os cosubstratos como a hidroxilamina deberían estar presentes no sistema de reacción de transferencia de acilo.
➢ O AMD debe engadirse o último no sistema de reacción co pH e a temperatura de reacción óptimos.
➢ Todos os tipos de AMD teñen diversas condicións óptimas de reacción, polo que cada unha delas debería ser estudada individualmente.
Exemplo 1(1):
Actividade de hidrólise en diferentes substratos de amida
| Substrato | Actividade específica μmol min-1mg-1 | Substrato | Actividade específica μmol min-1mg-1 |
| Acetamida | 3.8 | ο-OH benzamida | 1.4 |
| Propionamida | 3.9 | p-OH benzamida | 1.2 |
| Lactamida | 12,8 | ο-NH2benzamida | 1.0 |
| Butiramida | 11.9 | p-NH2benzamida | 0,8 |
| Isobutiramida | 26.2 | ο-Toluamida | 0,3 |
| Pentanamida | 22,0 | p-Toluamida | 8.1 |
| Hexanamida | 6.4 | Nicotinamida | 1.7 |
| Ciclohexanamida | 19,5 | Isonicotinamida | 1.8 |
| Acrilamida | 10.2 | Picolinamida | 2.1 |
| Metacrilamida | 3.5 | 3-fenilpropionamida | 7.6 |
| Prolinamida | 3.4 | Indol-3-acetamida | 1.9 |
| Benzamida | 6.8 |
A reacción levouse a cabo nunha solución tampón de fosfato de sodio 50 mM, pH 7,5, a 70 ℃.
| Amidas | Hidroxilamina | Hidracina |
| Acetamida | 8.4 | 1.4 |
| Propionamida | 18.4 | 3.0 |
| Isobutiramida | 25,0 | 22,7 |
| Benzamida | 9.2 | 6.1 |
A reacción levouse a cabo nunha solución tampón de fosfato de sodio 50 mM, pH 7,5, a 70 ℃.
Concentración de reactivos relacionada: amidas, 100 mM (benzamida, 10 mM); hidroxilamina e hidracina, 400 mM; encima 0,9 μM.
Exemplo 2(2):
Exemplo 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremófilos, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR e outros. *Process Biochemistry*, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM e outros. Química bioorgánica, 2017. Dispoñible en liña. 7.
