Amidase (AMD)
Enzimas:Son catalizadores biolóxicos macromoleculares, a maioría dos encimas son proteínas
Amidase:Cataliza a hidrólise de varias amidas alifáticas e aromáticas endóxenas e estrañas transferindo un grupo acilo á auga coa produción de ácidos libres e amoníaco.Os ácidos hidroxámicos e outros ácidos orgánicos úsanse amplamente como fármacos porque son constituíntes de factores de crecemento, antibióticos e inhibidores de tumores.As amidases pódense dividir en acilases tipo R e tipo S segundo a estereoselectividade do catalizador.
Ademais de catalizar a hidrólise das amidas, a amidase tamén pode catalizar as reaccións de transferencia de acilo en presenza de co-substratos como a hidroxilamina.
A amidase con diferentes fontes ten diferente especificidade de substrato, algunhas delas só poden hidrolizar amidas aromáticas, algunhas delas só poden hidrolizar amidas alifáticas e outras hidrolizar amidas α ou ω-amino.A maioría das aminas teñen unha boa actividade catalítica só para amidas acíclicas ou aromáticas simples, pero para amidas aromáticas complexas, as amidas heterocíclicas, especialmente as amidas con substituíntes orto, teñen unha actividade xeralmente baixa (só algúns encimas presentan mellores efectos catalíticos).
Mecanismo catalítico:
| Enzimas | Código do produto | Código do produto |
| Enzima en po | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | un conxunto de 19 amidases, 50 mg cada 19 elementos * 50 mg/elemento ou outra cantidade |
| Kit de detección (SynKit) | ES-AMD-1900 | un conxunto de 19 amidases, 1 mg cada 19 elementos * 1 mg / elemento |
★ Alta especificidade do substrato.
★ Forte selectividade quiral.
★ Alta eficiencia de conversión.
★ Menos subprodutos.
★ Condicións de reacción leves.
★ respectuoso co medio ambiente.
➢ O cribado enzimático debe realizarse para substratos específicos debido á especificidade do substrato, e obter un encima que cataliza o substrato obxectivo co mellor efecto catalítico.
➢ Nunca entrar en contacto con condicións extremas como: alta temperatura, pH alto/baixo e disolvente orgánico con alta concentración.
➢ Normalmente, o sistema de reacción debe incluír substrato, solución tampón (O pH de reacción óptimo do encima).Os co-substratos como a hidroxilamina deberían estar presentes no sistema de reacción de transferencia de acilo.
➢ A AMD debe engadirse en último lugar ao sistema de reacción cun pH e temperatura de reacción óptimos.
➢ Todos os tipos de DMAE teñen varias condicións de reacción óptimas, polo que cada un deles debe ser estudiado individualmente.
Exemplo 1(1):
Actividade de hidrólise a diferentes substratos de amida
| Substrato | Actividade específica μmol min-1mg-1 | Substrato | Actividade específica μmol min-1mg-1 |
| Acetamida | 3.8 | ο-OH benzamida | 1.4 |
| Propionamida | 3.9 | p-OH benzamida | 1.2 |
| Lactamida | 12.8 | ο-NH2benzamida | 1.0 |
| Butiramida | 11.9 | p-NH2benzamida | 0,8 |
| Isobutiramida | 26.2 | ο- Toluamida | 0,3 |
| Pentanamida | 22.0 | p- Toluamida | 8.1 |
| Hexanamida | 6.4 | Nicotinamida | 1.7 |
| Ciclohexanamida | 19.5 | Isonicotinamida | 1.8 |
| Acrilamida | 10.2 | Picolinamida | 2.1 |
| Metacrilamida | 3.5 | 3-fenilpropionamida | 7.6 |
| Prolinamida | 3.4 | Indol-3-acetamida | 1.9 |
| Benzamida | 6.8 |
A reacción realizouse en solución tampón de fosfato de sodio 50 mM, pH 7,5, a 70 ℃.
| Amidas | Hidroxilamina | Hidracina |
| Acetamida | 8.4 | 1.4 |
| Propionamida | 18.4 | 3.0 |
| Isobutiramida | 25.0 | 22.7 |
| Benzamida | 9.2 | 6.1 |
A reacción realizouse en solución tampón de fosfato de sodio 50 mM, pH 7,5, a 70 ℃.
Concentración de reactivo relacionada: amidas, 100 mM (benzamida, 10 mM);hidroxilamina e hidracina, 400 mM;encima 0,9 μM.
Exemplo 2(2):
Exemplo 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Extremófilos, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Process Biochemistry, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Química Bioorgánica, 2017, Dispoñible en liña 7.
